Este documento ofrece orientación sobre la preparación de nanomateriales para pruebas ecológicas y biotoxicológicas. Proporciona orientación sobre los factores relativos a la preparación de muestras y la determinación de la dosis que podrían ser útiles en los ensayos toxicológicos, incluidos los ecotoxicológicos, de materiales de ingeniería y manufacturados a nanoescala. Las descripciones de los factores del método de preparación de muestras para los ensayos toxicológicos in vitro e in vivo de materiales de ingeniería y manufacturados en nanoescala incluyen consideraciones sobre las propiedades fisicoquímicas, los medios, los métodos de estudios de transformación y acumulación, los efectos en la salud y la dosimetría. El documento no pretende ser un examen de la literatura ni una evaluación exhaustiva de la calidad de los métodos o los datos generados. El documento tiene por objeto complementar otros esfuerzos internacionales. El presente documento se centra en los factores que podrían dar lugar a resultados que no son pertinentes para las evaluaciones de seguridad. Cuando se presentan, se consideran los métodos de referencia por su interés general y su posible aplicabilidad. Es probable que la mayoría de los métodos descritos no sean aplicables en general a todos los nanomateriales, pero sí demuestran importantes factores y limitaciones que son comunes a una variedad de nanomateriales.